ମାଙ୍କିପକ୍ସ ଭାଇରସ୍ ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR କିଟ୍ |
ଉତ୍ପାଦ ବିବରଣୀ
ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟମୂଳକ ବ୍ୟବହାର
ଏହା ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR ସିଷ୍ଟମ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ମାନବ ସେରମ୍ କିମ୍ବା କ୍ଷତ ଏକ୍ସୁଡେଟ୍ ନମୁନାରେ ମାଙ୍କେପକ୍ସ ଭାଇରସ୍ ଚିହ୍ନଟ ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ |
ପରୀକ୍ଷା ନୀତି
ଏହି ଉତ୍ପାଦଟି ଏକ ଫ୍ଲୋରୋସେଣ୍ଟ୍ ପ୍ରୋବ-ଆଧାରିତ ଟାକମାନ® ରିଅଲ୍-ଟାଇମ୍ PCR ଆସେ ସିଷ୍ଟମ୍ |ମାଙ୍କେପକ୍ସ ଭାଇରସର F3L ଜିନ୍ ଚିହ୍ନଟ ପାଇଁ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପ୍ରାଇମର୍ ଏବଂ ପ୍ରୋବଗୁଡିକ ଡିଜାଇନ୍ କରାଯାଇଛି |ମିଥ୍ୟା-ନକାରାତ୍ମକ ଫଳାଫଳକୁ ଏଡାଇବା ପାଇଁ ମାନବ ସଂରକ୍ଷିତ ଜିନ୍ ନମୁନା ସଂଗ୍ରହ, ନମୁନା ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଏବଂ ରିଅଲ୍-ଟାଇମ୍ PCR ପ୍ରକ୍ରିୟା ଉପରେ ନଜର ରଖୁଥିବା ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ |କିଟ୍ ହେଉଛି ଏକ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ପ୍ରିମିକ୍ସ ଲାଇଫିଲାଇଜଡ୍ ସିଷ୍ଟମ୍, ଯେଉଁଥିରେ ମାଙ୍କେପକ୍ସ ଭାଇରସ୍ ଚିହ୍ନଟ ପାଇଁ ଆବଶ୍ୟକ ସାମଗ୍ରୀ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ: ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ଏମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ଏନଜାଇମ୍, UDG ଏନଜାଇମ୍, ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ବଫର୍, ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପ୍ରାଇମର୍ ଏବଂ ପ୍ରୋବ |
ମୁଖ୍ୟ ବିଷୟବସ୍ତୁ |
ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇଥିବା ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ ସାରଣୀରେ ତାଲିକାଭୁକ୍ତ |
| ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ | | ପ୍ୟାକେଜ୍ | ଉପାଦାନ |
| ମାଙ୍କଡପକ୍ସ ଭାଇରସ୍ |ଲିଓଫିଲାଇଜଡ୍ ପ୍ରେମିକ୍ସ | | 8 ଷ୍ଟ୍ରିପ୍ PCR ଟ୍ୟୁବ୍ |× 6 ପାଉଚ୍ | | ପ୍ରାଥମିକ, ଯା es ୍ଚ, dNTP / dUTP ମିଶ୍ରଣ, Mg2 +, Taq DNA polymerase, UDG Enzyme |
| MPV ସକରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ | | 400 μL × 1 ଟ୍ୟୁବ୍ | | ଟାର୍ଗେଟ୍ ଜିନ୍ ଧାରଣ କରିଥିବା DNA କ୍ରମ | |
| MPV ନକାରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ | | 400 μL × 1 ଟ୍ୟୁବ୍ | | ମାନବ ଜିନ୍ ସେଗମେଣ୍ଟ୍ ଧାରଣ କରିଥିବା DNA କ୍ରମ | |
| ସମାଧାନ ସମାଧାନ | 1 mL × 1 ଟ୍ୟୁବ୍ | | ସ୍ଥିରକାରୀ |
| ସମ୍ମତି ପ୍ରମାଣପତ୍ର | | 1 ଖଣ୍ଡ | / |
ଅପରେସନ୍ ଫ୍ଲୋ |
1. ନମୁନାସଂଗ୍ରହ:ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଭାବରେ ନିର୍ଜଳ ଟ୍ୟୁବରେ ନମୁନା ସଂଗ୍ରହ କରାଯିବା ଉଚିତ |
ମାନକ ବ technical ଷୟିକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ସହିତ |
2. ପୁନ ag ପ୍ରସ୍ତୁତି (ପୁନ ag ପ୍ରସ୍ତୁତି କ୍ଷେତ୍ର)
କିଟ୍ ର ଉପାଦାନଗୁଡିକ ବାହାର କରନ୍ତୁ, ଷ୍ଟାଣ୍ଡବାଇ ବ୍ୟବହାର ପାଇଁ ସେମାନଙ୍କୁ କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ ସନ୍ତୁଳିତ କରନ୍ତୁ |
3. ନମୁନା ପ୍ରକ୍ରିୟାକରଣ (ନମୁନା ପ୍ରକ୍ରିୟାକରଣ କ୍ଷେତ୍ର)
3.1 ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ନିଷ୍କାସନ |
ଭାଇରାଲ୍ ଡିଏନ୍ଏ ନିଷ୍କାସନ କିଟ୍ ର ଅନୁରୂପ ଆବଶ୍ୟକତା ଏବଂ ପ୍ରଣାଳୀ ଅନୁଯାୟୀ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ଉତ୍ତୋଳନ ପାଇଁ 200μL ତରଳ ନମୁନା, ପଜିଟିଭ୍ କଣ୍ଟ୍ରୋଲ୍ ଏବଂ ନେଗେଟିଭ୍ କଣ୍ଟ୍ରୋଲ୍ ନେବାକୁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି |
2.2 ଲିଓଫିଲାଇଜଡ୍ ପାଉଡର ଦ୍ରବଣ ଏବଂ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଯୋଗ |
ନମୁନା ସଂଖ୍ୟା ଅନୁଯାୟୀ ମାଙ୍କଡପକ୍ସ ଭାଇରସ୍ ଲିଓଫିଲାଇଜଡ୍ ପ୍ରିମିକ୍ସ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରନ୍ତୁ |ଗୋଟିଏ ନମୁନାରେ ଲିଓଫିଲାଇଜଡ୍ ପ୍ରିମିକ୍ସ ପାଉଡର ଧାରଣ କରିଥିବା ଗୋଟିଏ PCR ଟ୍ୟୁବ୍ ଆବଶ୍ୟକ |ନକାରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଏବଂ ସକରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣକୁ ଦୁଇଟି ନମୁନା ଭାବରେ ଗ୍ରହଣ କରାଯିବା ଉଚିତ୍ |
(1) ଲିଓଫିଲାଇଜଡ୍ ପ୍ରିମିକ୍ସ ଧାରଣ କରିଥିବା ପ୍ରତ୍ୟେକ PCR ଟ୍ୟୁବରେ 15μL ବିସର୍ଜନ ସମାଧାନ ଯୋଡନ୍ତୁ, ତାପରେ ପ୍ରତ୍ୟେକ PCR ଟ୍ୟୁବରେ ଯଥାକ୍ରମେ 5μL ବାହାର କରାଯାଇଥିବା ନମୁନା / ନକାରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ / ସକରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଯୋଗ କରନ୍ତୁ |
|
()) ଯଦି ଚିହ୍ନଟ ପାଇଁ ସାଧାରଣ ରିଅଲ୍-ଟାଇମ୍ PCR ଉପକରଣ ବ୍ୟବହାର କରେ, ତେବେ ସିଧାସଳଖ PCR ଟ୍ୟୁବ୍କୁ ଏମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ଏରିଆକୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତର କର;ଯଦି ଚିହ୍ନଟ ପାଇଁ BTK-8 ବ୍ୟବହାର କର, ତେବେ ନିମ୍ନଲିଖିତ କାର୍ଯ୍ୟଗୁଡ଼ିକ କରିବା ଆବଶ୍ୟକ: PCR ଟ୍ୟୁବରୁ 10 μL ତରଳ BTK-8 ର ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଚିପ କୂଅକୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତର କର |ଗୋଟିଏ PCR ଟ୍ୟୁବ୍ ଚିପ୍ ଉପରେ ଥିବା ଗୋଟିଏ କୂଅ ସହିତ ଅନୁରୂପ ଅଟେ |ପାଇପେଟିଂ କାର୍ଯ୍ୟ ସମୟରେ, ନିଶ୍ଚିତ କରନ୍ତୁ ଯେ ପାଇପେଟ୍ 90 ଡିଗ୍ରୀ ଭୂଲମ୍ବ ଅଟେ |ଏରୋସୋଲ୍ ବ୍ୟାରେଜ୍ ପାଇପେଟ୍ ଟିପ୍ସଗୁଡିକ ମଧ୍ୟମ ବଳ ସହିତ କୂଅର ମ in ିରେ ରଖାଯିବା ଉଚିତ ଏବଂ ଏହା ପ୍ରଥମ ଗିଅର୍ରେ ପହଞ୍ଚିବା ପରେ ପାଇପେଟ୍କୁ ଠେଲିବା ବନ୍ଦ କରିବା ଉଚିତ୍ (ବୁବୁଲ୍ସକୁ ଏଡାଇବା ପାଇଁ) |କୂଅଗୁଡ଼ିକ ପୂର୍ଣ୍ଣ ହେବା ପରେ, ସମସ୍ତ କୂଅକୁ ଆଚ୍ଛାଦନ କରିବା ପାଇଁ ଏକ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଚିପ୍ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ବାହାର କର ଏବଂ ପରେ ଚିପ୍ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ଚିହ୍ନଟ କ୍ଷେତ୍ରକୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ ହୁଏ |
4. PCR ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ (ଚିହ୍ନଟ କ୍ଷେତ୍ର)
4.1 PCR ଟ୍ୟୁବ୍ / ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଚିପ୍କୁ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଟ୍ୟାଙ୍କରେ ରଖନ୍ତୁ ଏବଂ ପ୍ରତ୍ୟେକ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାର ନାମକୁ ସଂପୃକ୍ତ କ୍ରମରେ ଭଲ ଭାବରେ ସେଟ୍ କରନ୍ତୁ |
4.2 ଚିହ୍ନଟ ଫ୍ଲୋରୋସେନ୍ସର ସେଟିଂସମୂହ: (1) ମାଙ୍କଡପକ୍ସ ଜୀବାଣୁ (FAM);(2) ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ (CY5) |
4.3 ନିମ୍ନଲିଖିତ ସାଇକେଲ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ ଚଲାନ୍ତୁ |
ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio ର ପ୍ରୋଟୋକଲ୍:
| ପଦକ୍ଷେପ | ତାପମାତ୍ରା | ସମୟ | ଚକ୍ରଗୁଡିକ | |
| 1 | ପୂର୍ବ-ବିଭାଜନ | | 95 ℃ | 2 ମିନିଟ୍ | | 1 |
| 2 | ଅବନତି | 95 ℃ | 10 s | 45 |
| ଆନ୍ନାଲିଙ୍ଗ୍, ବିସ୍ତାର, ଫ୍ଲୋରୋସେନ୍ସ ଅଧିଗ୍ରହଣ | | 60 ℃ | 30 s | ||
BTK-8 ର ପ୍ରୋଟୋକଲ୍:
| ପଦକ୍ଷେପ | ତାପମାତ୍ରା | ସମୟ | ଚକ୍ରଗୁଡିକ | |
| 1 | ପୂର୍ବ-ବିଭାଜନ | | 95 ℃ | 2 ମିନିଟ୍ | | 1 |
| 2 | ଅବନତି | 95 ℃ | 5 s | 45 |
| ଆନ୍ନାଲିଙ୍ଗ୍, ବିସ୍ତାର, ଫ୍ଲୋରୋସେନ୍ସ ଅଧିଗ୍ରହଣ | | 60 ℃ | 14 s | ||
5. ଫଳାଫଳ ବିଶ୍ଳେଷଣ (ଦୟାକରି ଉପକରଣ ବ୍ୟବହାରକାରୀ ମାନୁଆଲକୁ ଅନୁସରଣ କରନ୍ତୁ）)
ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପରେ, ଫଳାଫଳଗୁଡ଼ିକ ସ୍ୱୟଂଚାଳିତ ଭାବରେ ସଞ୍ଚୟ ହେବ |ବିଶ୍ଳେଷଣ କରିବାକୁ “ବିଶ୍ଳେଷଣ” କ୍ଲିକ୍ କରନ୍ତୁ, ଏବଂ ଯନ୍ତ୍ରଟି ସ୍ୱୟଂଚାଳିତ ଭାବରେ ପ୍ରତ୍ୟେକ ନମୁନାର Ct ମୂଲ୍ୟଗୁଡ଼ିକୁ ଫଳାଫଳ ସ୍ତମ୍ଭରେ ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରିବ |ନକାରାତ୍ମକ ଏବଂ ସକରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଫଳାଫଳଗୁଡିକ ନିମ୍ନଲିଖିତ "6. ଗୁଣବତ୍ତା ନିୟନ୍ତ୍ରଣ" ସହିତ ଅନୁରୂପ ହେବ |
6. ଗୁଣବତ୍ତା ନିୟନ୍ତ୍ରଣ
6.1 ନକାରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ: FAM ଚ୍ୟାନେଲରେ କ C ଣସି Ct କିମ୍ବା Ct> 40 ନାହିଁ, ସାଧାରଣ ବର୍ଦ୍ଧିତ ବକ୍ର ସହିତ CY5 ଚ୍ୟାନେଲରେ Ct≤40 |
6.2 ସକରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ: ସାଧାରଣ ବର୍ଦ୍ଧନ ବକ୍ର ସହିତ FAM ଚ୍ୟାନେଲରେ Ct≤35, ସାଧାରଣ ବର୍ଦ୍ଧନ ବକ୍ର ସହିତ CY5 ଚ୍ୟାନେଲରେ Ct≤40 |
6.3 ଯଦି ଉପରୋକ୍ତ ସମସ୍ତ ମାନଦଣ୍ଡ ପୂରଣ ହୁଏ ତେବେ ଫଳାଫଳ ବ valid ଧ ଅଟେ |ଅନ୍ୟଥା, ଫଳାଫଳ ଅବ alid ଧ ଅଟେ |
ଫଳାଫଳ ବ୍ୟାଖ୍ୟା
ନିମ୍ନଲିଖିତ ଫଳାଫଳ ସମ୍ଭବ:
| FAM ଚ୍ୟାନେଲର Ct ମୂଲ୍ୟ | CY5 ଚ୍ୟାନେଲର Ct ମୂଲ୍ୟ | ବ୍ୟାଖ୍ୟା | |
| 1# | କ C ଣସି Ct କିମ୍ବା Ct> 40 ନାହିଁ | | ≤40 | ମାଙ୍କଡପକ୍ସ ଜୀବାଣୁ ନକାରାତ୍ମକ | |
| 2# | ≤40 | ଯେକ Any ଣସି ଫଳାଫଳ | | ମାଙ୍କଡପକ୍ସ ଜୀବାଣୁ ସକରାତ୍ମକ | |
| 3# | 40 ～ 45 | ≤40 | ପୁନ test ପରୀକ୍ଷା;ଯଦି ଏହା ଏପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ 40 ~ 45 ଅଟେ, 1 # ଭାବରେ ରିପୋର୍ଟ କରନ୍ତୁ | |
| 4# | କ C ଣସି Ct କିମ୍ବା Ct> 40 ନାହିଁ | | କ C ଣସି Ct କିମ୍ବା Ct> 40 ନାହିଁ | | ଅବ val ଧ | |
ଧ୍ୟାନ ଦିଅନ୍ତୁ: ଯଦି ଅବ alid ଧ ଫଳାଫଳ ଘଟେ, ନମୁନା ସଂଗ୍ରହ କରି ପୁନର୍ବାର ପରୀକ୍ଷା କରାଯିବା ଆବଶ୍ୟକ |
ସୂଚନା ଅର୍ଡର କରନ୍ତୁ |
| ଉତ୍ପାଦର ନାମ | ବିଲେଇନା | ଆକାର | | ନମୁନା | ସେଲଫ୍ ଲାଇଫ୍ | | ଟ୍ରାନ୍ସ& ଷ୍ଟୋ।ଟେମ୍ପ୍ | |
| ମାଙ୍କିପକ୍ସ ଭାଇରସ୍ ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR କିଟ୍ | | B001P-01 | 48 ପରୀକ୍ଷା / କିଟ୍ | | ସେରମ୍ / ଲେସିନ୍ ଏକ୍ସୁଡେଟ୍ | | 12 ମାସ | -25 ～ -15 ℃ |
